支原体质粒

A. 支原体能否做为基因工程的载体

支原体作为整体应是不能作为基因工程载体的。
基因工程的载体有质粒、病毒等，版但其应用权的本质都是DNA，因为基因工程的目标基因是DNA，DNA只有和DNA才能相连。支原体是一种比细菌还要小的微生物，但我们可以分离出支原体中的质粒，把它作为基因工程的运载体。

B. 如何设计质粒

网络文库搜索质粒构建和引物设计即可，很详细。
引物设计的原则
引物设计有3 条基本原则：首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避 免形成稳定的二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应(即 错配)。
具体实现这3 条基本原则需要考虑到诸多因素，如引物长度（primer length），产物长度 （proct length），序列Tm 值(melting temperature)，引物与模板形成双链的内部稳定性 (internal stability, 用∆G 值反映)，形成引物二聚体(primer dimer)及发夹结构（plex formation and hairpin）的能值，在错配位点（false priming site）的引发效率，引物及产物的 GC 含量（composition），等等。必要时还需对引物进行修饰，如增加限制性内切酶位点，引进突变等。根据有关参考资料和笔者在实践中的总结，引物设计应注意如下要点：
1. 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延 伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应[2]。
2. 引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导 致错配。引物3’端出现3 个以上的连续碱基，如GGG 或CCC，也会使错误引发机率增 加[2]。
3. 引物3’端的末位碱基对Taq 酶的DNA 合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配 位置导致不同的扩增效率，末位碱基为A 的错配效率明显高于其他3 个碱基，因此应当避免在引物的3’端使用碱基A[3][4]。另外，引物二聚体或发夹结构也可能导致PCR 反应失败。5’端序列对PCR 影响不太大，因此常用来引进修饰位点或标记物[2]。
4. 引物序列的GC 含量一般为40-60%，过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大[2][5]。
5. 引物所对应模板位置序列的Tm 值在72℃左右可使复性条件最佳。Tm 值的计算有多种方法，如按公式Tm＝4(G+C)＋2(A+T)，在Oligo 软件中使用的是最邻近法(the nearest
neighbor method) [6][7]。
6. ∆G 值是指DNA 双链形成所需的自由能，该值反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性。应当选用3’端∆G 值较低（绝对值不超过9），而5’端和中间∆G 值相对较高的引物。引物的3’端的∆G 值过高，容易在错配位点形成双链结构并引发DNA 聚合反应[6]。
7. 引物二聚体及发夹结构的能值过高（超过4.5kcal/mol）易导致产生引物二聚体带，并且降低引物有效浓度而使PCR 反应不能正常进行[8]。
8. 对引物的修饰一般是在5’端增加酶切位点，应根据下一步实验中要插入PCR 产物的载 体的相应序列而确定。
值得一提的是，各种模板的引物设计难度不一。有的模板本身条件比较困难，例如GC
2
含量偏高或偏低，导致找不到各种指标都十分合适的引物；在用作克隆目的的PCR 因为产 物序列相对固定，引物设计的选择自由度较低。在这种情况只能退而求其次，尽量去满足条 件。
引物的自动搜索和评价分析
软件的引物设计功能主要体现在两个方面：首先是引物分析评价功能，该功能只有少数 商业版软件能够做到，其中以“Oligo 6”最优秀；其次是引物的自动搜索功能，各种软件在 这方面的侧重点不同，因此自动搜索的结果也不尽相同。据笔者的经验，自动搜索功能以 “Premier Primer”为最强且方便使用，“Oligo 6”其次，其他软件如“ector NTI Suit”、“Dnasis”、“Omiga”和“Dnastar”都带有引物自动搜索功能，但搜索结果不是十分理想。
要想得到效果很好的引物，在自动搜索的基础上还要辅以人工分析。笔者认为引物设计软件 的最佳搭配是“Oligo”和“Premier”软件合并使用，以“Premier”进行自动搜索，“Oligo” 进行分析评价，如此可快速设计出成功率很高的引物。
Primer Premier 5.0 的使用技巧简介
1. 功能
“Premier”的主要功能分四大块，其中有三种功能比较常用，即引物设计( )、
限制性内切酶位点分析( )和DNA 基元(motif)查找( )。“Premier”还具有同源
性分析功能（ ），但并非其特长，在此略过。此外，该软件还有一些特殊功能，其中
最重要的是设计简并引物，另外还有序列“朗读”、DNA 与蛋白序列的互换（ ）、
语音提示键盘输入（ ）等等。
有时需要根据一段氨基酸序列反推到DNA 来设计引物，由于大多数氨基酸（20 种常见 结构氨基酸中的18 种）的遗传密码不只一种，因此，由氨基酸序列反推DNA 序列时，会 遇到部分碱基的不确定性。这样设计并合成的引物实际上是多个序列的混和物，它们的序列组成大部分相同，但在某些位点有所变化，称之为简并引物。遗传密码规则因物种或细胞亚结构的不同而异，比如在线粒体内的遗传密码与细胞核是不一样的。“Premier”可以针对模板DNA 的来源以相应的遗传密码规则转换DNA 和氨基酸序列。软件共给出八种生物亚结 构的不同遗传密码规则供用户选择，有纤毛虫大核（Ciliate Macronuclear）、无脊椎动物线粒 体（Inertebrate Mitochondrion）、支原体（Mycoplasma）、植物线粒体（Plant Mitochondrion）、原生动物线粒体（Protozoan Mitochondrion）、一般标准（Standard）、脊椎动物线粒体（ertebrate Mitochondrion）和酵母线粒体（Yeast Mitochondrion）。
2. 使用步骤及技巧
“Premier”软件启动界面如下：
其主要功能在主界面上一目了然（按钮功能如上述）。限制性酶切点分析及基元查找功 能比较简单，点击该功能按钮后，选择相应的限制性内切酶或基元（如-10 序列，-35 序列 等），按确定即可。常见的限制性内切酶和基元一般都可以找到。你还可以编辑或者添加新 限制性内切酶或基元。
进行引物设计时，点击按钮，界面如下：
进一步点击按钮，出现“search criteria”窗口，有多种参数可以调整。搜索目
的（Seach For）有三种选项，PCR 引物（PCR Primers），测序引物（Sequencing Primers），杂交探针（Hybridization Probes）。搜索类型(Search Type)可选择分别或同时查找上、下游引物（Sense/Anti-sense Primer，或Both），或者成对查找（Pairs），或者分别以适合上、下游引物为主（Compatible with Sense/Anti-sense Primer）。另外还可改变选择区域（Search Ranges），引物长度（Primer Length），选择方式（Search Mode），参数选择（Search Parameters）
等等。使用者可根据自己的需要设定各项参数。如果没有特殊要求，建议使用默认设置。然 后按，随之出现的Search Progress 窗口中显示Search Completed 时，再按， 这时搜索结果以表格的形式出现，有三种显示方式，上游引物（Sense），下游引物 (Anti-sense)，成对显示(Pairs)。默认显示为成对方式，并按优劣次序（Rating）排列，满分 为100，即各指标基本都能达标（如下图）。
点击其中一对引物，如第1#引物，并把上述窗口挪开或退出，显示“Peimer Premier”
主窗口，如图所示：
该图分三部分，最上面是图示PCR 模板及产物位置，中间是所选的上下游引物的一些
5 性质，最下面是四种重要指标的分析，包括发夹结构（Hairpin），二聚体（Dimer），错误引 发情况（False Priming），及上下游引物之间二聚体形成情况（Cross Dimer）。当所分析的引
物有这四种结构的形成可能时，按钮由变成，点击该按钮，在左下角的
窗口中就会出现该结构的形成情况。一对理想的引物应当不存在任何一种上述结构，因此最 好的情况是最下面的分析栏没有，只有。值得注意的是中间一栏的末尾给出该引物的最佳退火温度，可参考应用。
在需要对引物进行修饰编辑时，如在5’端加入酶切位点，可点击，然后修改引物序列。若要回到搜索结果中，则点击按钮。
如果要设计简并引物，只需根据源氨基酸序列的物种来源选择前述的八种遗传密码规
则，反推至DNA 序列即可。对简并引物的分析不需像一般引物那样严格。
总之，“Premier”有优秀的引物自动搜索功能，同时可进行部分指标的分析，而且容易
使用，是一个相当不错的软件。
Oligo 6.22 使用技巧简介
1. 功能
在专门的引物设计软件中，“Oligo”是最著名的。它的使用并不十分复杂，但初学者容
易被其复杂的图表吓倒。Oligo 5.0 的初始界面是两个图：Tm 图和ΔG 图；Oligo .22 的界面更复杂，出现三个图，加了个Frq 图。“Oligo”的功能比“Premier”还要单一，就是引物设计。但它的引物分析功能如此强大以至于能风靡全世界。
2. 使用（以Oligo 6.22 为例）
Oligo 6.22 的启动界面如下：
图中显示的三个指标分别为Tm、ΔG 和Frq，其中Frq 是6.22 版本的新功能，为邻近6
至7 个碱基组成的亚单位在一个指定数据库文件中的出现频率。该频率高则可增加错误引发6的可能性。因为分析要涉及多个指标，起动窗口的cascade 排列方式不太方便，可从windows菜单改为tili 方式。如果觉得太拥挤，可去掉一个指标，如Frq，这样界面的结构同于Oligo 5.0，只是显示更清楚了。
经过Windows/Tili 项后的显示如图：
在设计时，可依据图上三种指标的信息选取序列，如果觉得合适，可点击Tm 图块上左 下角的Upper 按钮，选好上游引物，此时该按钮变成，表示上游引物已选 取好。下游引物的选取步骤基本同上，只是按钮变成Lower。∆G 值反映了序列与模板的结
合强度，最好引物的∆G 值在5’端和中间值比较高，而在3’端相对低（如图：）
Tm 值曲线以选取72℃附近为佳，5’到3’的下降形状也有利于引物引发聚合反应。Frq 曲线 为“Oligo 6”新引进的一个指标，揭示了序列片段存在的重复机率大小。选取引物时，宜选用3’端Frq 值相对较低的片段。
当上下游引物全选好以后，需要对引物进行评价并根据评价对引物进行修改。首先检查引物二聚体尤其是3’端二聚体形成的可能性。需要注意的是，引物二聚体有可能是上游或 下游引物自身形成，也有可能是在上下游引物之间形成（cross dimer）。二聚体形成的能值 越高，越不符合要求。一般的检测（非克隆）性PCR，对引物位置、产物大小要求较低，因而应尽可能选取不形成二聚体或其能值较低的引物。第二项检查是发夹结构（hairpin）；
与二聚体相同，发夹结构的能值越低越好。一般来说，这两项结构的能值以不超过4.5 为好。 当然，在设计克隆目的的PCR 引物时，引物两端一般都添加酶切位点，必然存在发夹结构， 而且能值不会太低。这种PCR 需要通过灵活调控退火温度以达到最好效果，对引物的发夹 结构的检测就不应要求太高。第三项检查为GC 含量，以45-55％为宜。有一些模板本身的GC 含量偏低或偏高，导致引物的GC 含量不能被控制在上述范围内，这时应尽量使上下游 引物的GC 含量以及Tm 值保持接近，以有利于退火温度的选择。如果PCR 的模板不是基 因组DNA，而是一个特定模板序列，那么最好还进行False priming site 的检测。这项检查可以看出引物在非目的位点引发PCR 反应的可能性。如果引物在错配位点的引发效率比较 高，就可能出假阳性的PCR 结果。一般在错配引发效率以不超过100 为好，但对于特定的7
8
模板序列，还应结合比较其在正确位点的引发效率。如果两者相差很大，比如在正确位点的 引发效率为450 以上，而在错误位点的引发效率为130，那么这对引物也是可以接受的。
当我们结束以上四项检测，按Alt+P 键弹出PCR 窗口，其中总结性地显示该引物的位
置、产物大小、Tm 值等参数，最有用的是还给出了推荐的最佳退火温度和简单的评价。
由于“Oligo”软件的引物自动搜索功能与“Primer Premier 5”的相类似，并且似乎并
不比后者更好用，在此不再赘述。其实，使用软件自动搜索引物就是让计算机按照人的要求
去寻找最佳引物，如果参数设置得当将大大提高工作效率。

C. 高中生物细胞问题一箩筐

我不知道你的盲点在哪，按我的理解，把分类及你提到的东西特点跟你清楚的说说吧：
1.生物：非细胞生物：病毒
细胞生物 ：原核生物：细菌（乳酸菌，光合细菌，硝化细菌）
蓝细菌（蓝藻）
放线菌
立克次氏
支原体（支原体）
衣原体（衣原体）
真核生物：动物（蛔虫）
植物
真菌（酵母菌）
原生生物：藻类（衣藻，黑藻，水绵）
原生动物（变形虫）
原生菌

2.内质网高尔基体是真核生物特有的细胞器，部分真核的原生生物由于结构过
于简单，仅一个细胞组成，很多生命活动都在细胞膜上完成，并没有内质网
高尔基体结构，但是，原核生物是绝对不可能有内质网和高尔基体的

内质网分滑面内质网粗面内质网两种，粗面是因为上面附着了核糖体，内质
网与三大物质代谢合成有关，可以向高尔基体分泌小泡即物质传递

高尔基体的主要功能是将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装，然
后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。
在植物细胞中高尔基体与细胞壁的合成有关（合成纤维素果胶）

3.按分类中提到的顺序介绍：
乳酸菌：没什么特别的，一类产乳酸的细菌而已
光合细菌：进行光合作用，没有叶绿体哦，有光和所需色素而已
硝化细菌：在N循环中是重要角色，但是结构没什么很特别的
蓝藻：很古老的种类，有光合片层结构，色素就在那上面
支原体：最小的细胞生物，只有核糖体一种细胞器
衣原体：一种致病原而已，不典型
以上生物无内质网及高尔基体
蛔虫：最大的特色是没有线粒体其它细胞器齐全
酵母菌：单细胞真菌，研究时常用的材料，它有质粒（质粒在细菌等原核生
物中广泛存在）
衣藻，黑藻：均为藻类没的说
水绵：有很大的叶绿体，记得生物书上做的那个好氧菌的实验不？就是用的
这个
变形虫：身体没有固定形状，单细胞结构简单，无内质网及高尔基体
以上除变形虫外均有内质网及高尔基体

我是生物专业的大二学生，以上内容均保证正确，有问题可以再问我，祝学习进步

D. 酵母菌与支原体最主要的区别

酵母菌有细胞核。个体大得多。

酵母菌是一类单细胞真菌，在有氧和无氧环境下都能生存，属于兼性厌氧菌。多数酵母可以分离于富含糖类的环境中，比如一些水果（葡萄、苹果、桃等）或者植物分泌物（如仙人掌的汁）。一些酵母在昆虫体内生活。酵母菌是单细胞真核微生物。酵母菌细胞的形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1~5微米或5~20微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。酵母菌具有典型的真核细胞结构，有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等，有的还具有微体。
酵母菌的遗传物质组成：细胞核DNA，线粒体DNA，以及特殊的质粒DNA。
大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。
未发现其有性阶段的酵母菌称假酵母。

支原体（mycoplasma）：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。支原体的大小为0.2～0.3um,可通过滤菌器，常给细胞培养工作带来污染的麻烦。无细胞壁，不能维持固定的形态而呈现多形性。革兰氏染色不易着色，故常用Giemsa染色法将其染成淡紫色。细胞膜中胆固醇含量较多，约占36%，对保持细胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于胆固醇的物质（如二性霉素B、皂素等）均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。

E. 支原体为什么不能做运载体

作为载体的基本要求是对宿主细胞没有毒性,支原体本身是破坏细胞的,不能用

F. 酵母菌属于原核细胞还是真核细胞

酵母是常用的真核生物受体细胞，培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便。酵母克隆载体的种类也很多。

酵母菌也有质粒存在，这种2μm 长的质粒称为2μm 质粒，约6 300bp。这种质粒至少有一段时间存在于细胞核内染色体以外，利用2μm 质粒和大肠杆菌中的质粒可以构建成能穿梭于细菌与酵母菌细胞之间的穿梭质粒。酵母克隆载体都是在这个基础上构建的。

酵母菌同其它活的有机体一样需要相似的营养物质，像细菌一样它有一套胞内和胞外酶系统，用以将大分子物质分解成细胞新陈代谢易利用的小分子物质，属于异养生物。

(6)支原体质粒扩展阅读

因为酵母的主要成分是蛋白质，几乎占了酵母干物质的一半含量，而且人体必需氨基酸含量充足，尤其是谷物中较缺乏的赖氨酸含量较多。另一方面，含有大量的维生素B1，维生素B2及尼克酸。所以，酵母能提高发酵食品的营养价值。

多数酵母可以分离于富含糖类的环境中，比如一些水果（葡萄、苹果、桃等）或者植物分泌物（如仙人掌的汁）。一些酵母在昆虫体内生活。

酵母菌是单细胞真核微生物，形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等，比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1～5或5～20微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。酵母菌具有典型的真核细胞结构，有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等，有的还具有微体。

G. 支原体怎么看

支原体是一类原核细胞微生物，是目前认为能在无细胞培养基内繁殖的最小微生物。不具有细胞壁，呈高度多形性，最小球形颗粒直径仅125mm，大颗粒可达2-3μm。可通过细菌过滤器，形态上有颗粒状、球杆状、棒状、环形和不规则形状。
临床上，最常见到的肺炎支原体、解脉支原体、人型支原体等。解脉支原体、人型支原体可引起人类的非淋病性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎、不孕症和慢性前列腺炎等疾病。支原体呈阳性就是已经受感染了。后果是可能得以上的某种病，经过治疗一般都可治愈的。
支原体对抗生素的敏感度不一，对红霉素、四环素、氯霉素类均较敏感，对青霉素、头孢类、多粘菌素和杆菌肽类多耐药。由于支原体有种类较多的血清型别，对抗生素的敏感性也有差异。近年来由于抗生素的广泛应用，微生物受到抗生素的刺激机率大量增加，致使微生物对药物的耐受性也相应提高。更有甚者是一些耐药性微生物的哀老死亡后，其裂解后的微质粒可互相传递，使基因重组后的微生物对抗生素的耐受性不断增强。有些甚至对抗生素产生依赖性，这就是临床上有些支原体的感染者老治不愈的原因。
目前，据我们的试验证明，支原体对四环素、氯霉素、红霉素类、奎诺酮类等药物都有产生耐药的可能。因此，当感染支原体后产生病变，就应当到有条件的医院做支原体培养和药物敏感试验，了解支原体对何种药敏感，再选择药物进行治疗，这样才能有效地做到合理用药，及早彻底治愈疾病，有效地控制性传播疾病的传播。

H. 支原体和衣原体有没有质粒呢

支原体（如猪肺炎支原体等）、衣原体（如沙眼衣原体等）和蓝藻都有质粒存在。
【由原核细胞组成的生物。包括蓝细菌、细菌、古细菌、放线菌、立克次氏体、螺旋体、支原体和衣原体等。具有以下特点：
①核质与细胞质之间无核膜，因而无成形的细胞核。
②遗传物质是一条不与组蛋白结合的环状双螺旋脱氧核糖核酸(DNA)丝，不构成染色体(有的原核生物在其主基因组外还有更小的能进出细胞的质粒DNA)。
③以简单二分裂方式繁殖，无有丝分裂或减数分裂。
④鞭毛并非由微管构成，更无“9＋2”的结构，仅由几条螺旋或平行的蛋白质丝构成。
⑤细胞质内仅有核糖体而没有线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、液泡和质体(植物)、中心粒等细胞器，核糖体的沉降系数为70S。
⑥大部分原核生物有成分和结构独特的细胞壁等等。】

I. 关于支原体

支原体是一类原核细胞微生物，是目前认为能在无细胞培养基内繁殖的最小微生物。不具有细胞壁，呈高度多形性，最小球形颗粒直径仅125mm，大颗粒可达2-3μm。可通过细菌过滤器，形态上有颗粒状、球杆状、棒状、环形和不规则形状。
临床上，最常见到的肺炎支原体、解脉支原体、人型支原体等。解脉支原体、人型支原体可引起人类的非淋病性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎、不孕症和慢性前列腺炎等疾病。支原体呈阳性就是已经受感染了。后果是可能得以上的某种病，经过治疗一般都可治愈的。
支原体对抗生素的敏感度不一，对红霉素、四环素、氯霉素类均较敏感，对青霉素、头孢类、多粘菌素和杆菌肽类多耐药。由于支原体有种类较多的血清型别，对抗生素的敏感性也有差异。近年来由于抗生素的广泛应用，微生物受到抗生素的刺激机率大量增加，致使微生物对药物的耐受性也相应提高。更有甚者是一些耐药性微生物的哀老死亡后，其裂解后的微质粒可互相传递，使基因重组后的微生物对抗生素的耐受性不断增强。有些甚至对抗生素产生依赖性，这就是临床上有些支原体的感染者老治不愈的原因。
目前，据我们的试验证明，支原体对四环素、氯霉素、红霉素类、奎诺酮类等药物都有产生耐药的可能。因此，当感染支原体后产生病变，就应当到有条件的医院做支原体培养和药物敏感试验，了解支原体对何种药敏感，再选择药物进行治疗，这样才能有效地做到合理用药，及早彻底治愈疾病，有效地控制性传播疾病的传播。

J. 妇科做分泌物检查为UU阳性UU是什么支原体阳性吗

支原体是一类原核细胞微生物，是目前认为能在无细胞培养基内繁殖的最小微生物。不具有细胞壁，呈高度多形性，最小球形颗粒直径仅125mm，大颗粒可达2-3μm。可通过细菌过滤器，形态上有颗粒状、球杆状、棒状、环形和不规则形状。
临床上，最常见到的肺炎支原体、解脉支原体、人型支原体等。解脉支原体、人型支原体可引起人类的非淋病性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎、不孕症和慢性前列腺炎等疾病。支原体呈阳性就是已经受感染了。后果是可能得以上的某种病，经过治疗一般都可治愈的。
支原体对抗生素的敏感度不一，对红霉素、四环素、氯霉素类均较敏感，对青霉素、头孢类、多粘菌素和杆菌肽类多耐药。由于支原体有种类较多的血清型别，对抗生素的敏感性也有差异。近年来由于抗生素的广泛应用，微生物受到抗生素的刺激机率大量增加，致使微生物对药物的耐受性也相应提高。更有甚者是一些耐药性微生物的哀老死亡后，其裂解后的微质粒可互相传递，使基因重组后的微生物对抗生素的耐受性不断增强。有些甚至对抗生素产生依赖性，这就是临床上有些支原体的感染者老治不愈的原因。
目前，据我们的试验证明，支原体对四环素、氯霉素、红霉素类、奎诺酮类等药物都有产生耐药的可能。因此，当感染支原体后产生病变，就应当到有条件的医院做支原体培养和药物敏感试验，了解支原体对何种药敏感，再选择药物进行治疗，这样才能有效地做到合理用药，及早彻底治愈疾病，有效地控制性传播疾病的传播。

支原体感染与诊断

支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。支原体的种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域，给人类健康和科研工作带来不利影响。
从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎支原体（M.pneumoniae）、解脲支原体（Ureaplasma urealyticum）、人型支原体（M.homins）、生殖支原体（M.genitalium）及发酵支原体（M.fermentans）。
从动物体内分离并鉴定出了几十种支原体，仅少部分引起不同程度的疾病，能造成严重危害的有四种，即：丝状支原体丝状亚种、鸡毒支原体、猪肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种。支原体广泛分布于植物与昆虫中，引起植物和昆虫病害的支原体有植原体和螺原体两大类。

支原体感染
致病支原体中，肺炎支原体起肺炎，人型支原体、解脲支原体和生殖器支原体主要泌尿生殖道感染。支原体肺炎又称原发性非典型肺炎，支原体肺炎全年均可发病，以冬季多见，可有小流行。支原体脑炎是学龄前儿童及青年人常见的一种肺炎，支原体肺炎主要通过飞沫传播，潜伏期较长，可达2～3周。支原体肺炎虽然病程较长，肺部病变较重，炎症吸收较慢，但绝大多数预后都是良好的，合并症亦少。生殖器支原体感染是近年新明确的一种性接触传播疾病。成人主要通过性接触传播，新生儿则由母亲生殖道分娩时感染。成人男性的感染部位在尿道粘膜，女性感染部位在宫颈。新生儿主要引起结膜炎和肺炎。

支原体的实验诊断
支原体实验室检测方法有：形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。
解脲支原体MB抗原的研究表明：MB抗原是解脲支原体感染时被识别的主要外膜抗原，具有种特异性，包含血清特异的和交叉反应的抗原决定簇。编码MB抗原的基因长1200多个碱基、N端1/3为保守区，包含群特异的抗原决定簇：C端2/3是由重复序列组成的可变区，包含型特异的抗原决定簇，对该抗原的研究及对于研究疾病的发病机制和免疫机制起重要作用。MB抗原位于解脲支原体膜的表面，N端固定于膜上使C端重复区暴露于微生物周围的微环境。N端可以作为其分群分型的基础，C端最可能首先与宿主的防御系统相遇而引起主要的抗体反应，是理解它的发病机制和免疫机制的基础。MB抗原与疾病的关系，以及它在疾病中的作用还有待进一步探讨。
测定支原体抗体的血清学试验方法中，有支原体特异性血清学检测和非特异性血清学检测：支原体特异性血清学检测方法中，最常用的是补体结合试验，另有间接免疫荧光染色检查法、生长抑制试验、代谢抑制试验、间接血凝试验、酶免疫法和酶联免疫吸附试验（ELISA）等。支原体的非特异血清学方法有肺炎支原体冷凝集试验与MG链球菌凝集试验，对支原体肺炎能起辅助诊断的作用。检测特异性抗体IgG的方法尚不能达到早期快速诊断的目的，抗原的检测为今后研究的发展方向。目前已有用酶联免疫吸附试验、荧光标记抗体、肺炎支原体膜蛋白单克隆抗体和反向间接血凝法直接检测分泌物和体液中支原体抗原的报道，具有很高的特异度和灵敏度。人体感染肺炎支原体后,能产生特异性IgM和IgG类抗体。IgM类抗体出现早，一般在感染后1周出现，3～4周达高峰，以后逐渐降低。由于肺炎支原体感染的潜伏期为2～3周，当患者出现症状而就诊时，IgM抗体已达到相当高的水平，因此IgM抗体阳性可作为急性期感染的诊断指标。如IgM抗体阴性，则不能否定肺炎支原体感染, 需检测IgG抗体。IgG较IgM出现晚，需动态观察，如显著升高提示近期感染，显著降低说明处于感染后期。由此提示IgG与IgM同时测定，可提高诊断率，达到指导用药、提高疗效之目的。Savyon公司提供支原体IgM、IgG和IgA抗体ELISA检测试剂盒。
支原体分子生物学检测方法有基因探针和聚合酶链反应（PCR）等方法。基因探针的核酸杂交法，虽然敏感性和特异性都很高，但基因探针常用同位素标记，放射性危害大，设备要求高且繁琐难以推广，近年来发展的PCR技术，使得支原体检测变得简便、快速、敏感、特异，为支原体的检测和实验研究开辟了一个广阔的前景。

tu1血清标本中的MP抗体与板上包被的MP抗原结合

tu2抗人IgG／IgM/IgA-HRP和板上的抗原抗体复合物结合

tu3加入的底物被酶分解的产物的颜色深度与标本中抗体的浓度成正比

SeroMP支原体ELISA试剂盒
本试剂盒是检测支原体肺炎的第三代产品，它通过ELISA法在酶标板上完成人血清的IgM、IgG和IgA抗体检测。沙眼衣原体感染的诊断方法有细胞培养、直接抗原检测、分子生物学和血清学方法。直接抗原检测法中获取标本（在感染部位取材）较困难，所得结果可靠性也不强。而本试剂盒采用的血清学检测以血清为标本，可检测各个部位和各个时期的肺炎衣原体感染，并且某一类型的抗体象征疾病处于一定发展阶段。

细胞培养支原体感染
细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明，95％以上是以下四种支原体：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和莱氏无胆甾原体（A.laidlawii），为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。
支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（一些支原体在人体是正常菌群）、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如 -内酰胺类、万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素（polymycin）、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮；其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。InvivoGen公司研究开发的新一代支原体抗生素M-Plasmocin能有效地杀灭支原体，不影响细胞本身的代谢，并且用M-Plasmocin处理过的培养细胞，不会重新感染支原体。