⑴ 载体和质粒的区别
1、概念不同
质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体(或拟核)以外的DNA分子。
载体:某些能传递能量或运载其他物质的物质。
2、存在不同
质粒广泛存在于生物界,从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人类机体中都含有。
载体只作为两个物质之间沟通的桥梁。
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分类
1、根据质粒能否通过细菌的接合作用,可分为接合性质粒和非接合性质粒。接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。
2、根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类:严紧控制型和松弛控制型。严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用,只能在细胞周期的一定阶段进行复制,当细胞染色体停止复制时,质粒也就不再复制。松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响,在整个细胞生长周期中随时都可以复制,在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。
3、根据质粒的不相容性,可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象,反之为相容性。
⑵ 质粒载体的三要素
用于克隆表抄达的质粒载体通常袭涉及的三要素:
1.复制子:又称复制起始区,包含控制质粒DNA复制起点和质粒拷贝数等遗传因素。
复制子可分为为:①严谨型复制子②松弛型复制子。
2.选择标记:由质粒编码的选择标记赋予宿主细胞新的表型,用于鉴定和筛选转化有质粒的宿主细胞。最常见的选择标记为抗生素抗性基因,包括:氨苄西林、氯霉素、卡那霉素、新霉素
3.多克隆位点:
质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体,必须包括三部分:遗传标记基因,复制区,目的基因。
⑶ 质粒载体的种类有哪些啊
在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等。常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有27种限制性内切酶的单一识别位点。如果将DNA片段插入EcoRI切点,不会影响两个抗生素基因的表达。但是如果将DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切点,就会使抗四环素基因失活。这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对)。 1973年,科学家将质粒作为基因的载体使用,为基因工程的诞生奠定了基础。 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。这种质粒常含有抗生素抗性基因,例如,卡那霉素抗性基因。 你可以到生物帮那里详细的了解一下,我知道那里会有这方面的介绍的,有空的话,可以自己去查找一下啊,这里就是 www.bio1000.com/zt/dna/201562.html 应该可以帮到你的。
⑷ 为何经常用质粒做载体
因为质粒是有自我复制功能。
而且他是双链的结构。和大部分DNA一样。
它的回DNA分子上有一个或多个限制性核答酸内切酶的割位点。供外源基因片刻插入。
它的分子上还有特殊遗传标记基因。如抗四环素等。
方便表达载体导入后的检测。
但是真正用作载体的质粒都是天然质粒人工改造过的。
⑸ 质粒载体的四个基本特征
一、质粒载体的四个基本特征
1、质粒载体具有独立复制的能力。
2、质粒载体具有选择标记。
3、质粒载体具有独特的酶切位点。
4、质粒载体能够转化但是不扩散。
二、质粒的结构及性质
质粒是细菌染色体外的DNA分子,存在于细胞质中,具有自主复制能力,使其在子代细胞中能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质,可自行丢失或人工处理而消除,如高温、紫外线等。
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质粒载体的使用:
1、基因过表达
一般是将目的片段整合到病毒或者质粒载体上,在目的基因上游加入调控元件,转染到宿主细胞中表达,使基因在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达,可以获取大量的目的基因产物,一般是蛋白质,用于研究或生产。
2、用作报告基因
质粒载体广泛应用于转录调控研究领域,包括启动子活性分析、miRNA与靶标鉴定、转录调控因子鉴定及转录调控因子结合位点等实验,将转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染到宿主细胞,通过检测报告基因产物表达量,判断启动子和转录因子的结合情况。
⑹ 质粒和基因表达载体有什么区别
在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表达载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段;表达载体则用于在宿主细胞中获得外援基因的表达产物.
⑺ 常用的质粒载体有哪些
载体种类:质粒、噬菌体、腺病毒载体、逆转录病毒载体
质粒特点:回
存在于细菌染色体外的小型答环状DNA分子。
具有自我复制功能。
带有抗性基因及表型识别等遗传性标记物。
经改造后具有多克隆位点。
举例:pMD-18T质粒、pUCl9质粒、pBR322质粒等
⑻ 基因表达载体和重组质粒的区别
一、构成不同
基因表达载体:构成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。
重组质专粒:构成包括目属的基因片段、质粒、酶。
二、对象不同
基因表达载体:基因表达载体的对象通常是活细胞。
重组质粒:重组质粒的对象通常是细菌。
三、原理不同
基因表达载体:将不同来源的基因在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞。
重组质粒:用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段, 在体外使两者相连接, 得到重组质粒。
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一、基因表达载体分为两大类:
1、病毒载体
病毒载体主要包括慢病毒、腺病毒、逆转录病毒、腺相关病毒等。
2、非病毒载体
非病毒载体主要包括裸露DNA、脂质体、纳米载体等。
二、基因表达载体的过程
过程包括:过表达质粒选择、目的基因获取、引物设计、过表达质粒构建。在进行基因过表达过程中,可以选择不同的过表达载体。过表达载体与克隆载体比较而言,加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。
⑼ 你好,请问质粒和基因表达载体有什么区别
质粒是将外源基因送入细胞的东西。所以说质粒基因表达载体最主要部分。就像运输车,而运输车不可能是空空的吧,应该装有东西,如果装了很多东西,就叫基因表达载体,上面主要装有启动子,终止子,目的基因等!
⑽ 什么是质粒克隆载体
质粒(plasmid)是一种寄生于细菌细胞内、独立于染色体外的裸露DNA分子,一个质粒就是一个DNA分子。
在宿主细胞内,质粒一般以超螺旋DNA的形式存在。分子大小差异也很大,小的不足2kb,大的可达100kb以上,多数在10kb左右。在许多细菌、乳酸杆菌、蓝藻、酵母等生物中均发现含有质粒,并构建了相应的质粒载体。
质粒载体是以质粒DNA分子为基础构建而成的克隆载体,含有质粒的复制起始位点,能够按质粒复制的形式进行复制。